正确答案: ABDEF

每条引物长度通常为18~25个核苷酸 引物3'端的第1、2个碱基必须与模板严格配对 引物5'端可加修饰成分,如酶切位点、引入突变位点、生物素标记等 两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度 引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区

题目: PCR引物设计是实验成败的关键环节。

解析:引物设计的原则包括:①引物长度以18~25bp为宜,引物过长,模板结合不充分,导致扩增产物减少;引物过短(<15bp),导致非特异性扩增,降低产物的特异性。②引物序列通常位于基因组DNA的高度保守区。一对引物间不应存在互补序列,避免形成引物二聚体。③两引物有匹配的GC含量和相似的退火温度,否则会影响扩增的效率和特异性。通常G+C含量为45%~55%。④引物3'端的第1、2个碱基影响Taq DNA聚合酶的延伸效率,影响PCR的扩增效率和特异性,必须与模板严格配对;引物5'端可加修饰成分,如酶切位点、引入突变位点、启动子序列、生物素、荧光素和地高辛标记等,以便对产物进行分析和克隆等。

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举一反三的答案和解析:

  • [多选题]蛋白质-蛋白质相互作用的形式不包括 ( )
  • 蛋白质亚基的聚合

    交叉聚合

    分子识别

    分子的自我装配

    多酶复合体


  • [多选题]对核酸一蛋白质杂交实验的描述,正确的是 ( )
  • 又称为Southwestern杂交

    可鉴定蛋白质与DNA的特异结合

    可以大概确定结合蛋白质的分子量


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